En 1992, après avoir fréquenté l’Académie des Beaux-Arts de sa ville natale, il obtient un diplôme en scénographie. Il alterne alors entre son activité de scénographe et celle de dessinateur, entamant une carrière dans la bande dessinée…
Dès 1994, il rejoint les éditions Bonelli pour qui, Il entamera une collaboration sur la série Zona X, puis fait partie du staff des auteurs de Magico Vento et Tex Willer. Dès lors Mario Milano se consacre également à l’illustration ainsi qu’à la peinture au pistolet pulvérisateur. En 2007, Il travaille pour la France sur la série Touna-Mara, sur un scénario de Patrick Galliano. Il signe Chez Sergio Bonelli Editore, dans la nouvelle collection cartonnée couleurs, Coups de fouet en retour, une aventure de Tex signé Pasquale Ruju, paru en France en 2021.